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ELISA試劑盒的操作程序
發(fā)布時間： 2017-09-18 點(diǎn)擊次數(shù)： 1346次ELISA試劑盒操作程序
1． 分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其他各步操作相同）、規(guī)范品孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上規(guī)范品孔中參加規(guī)范品50μl；在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。每孔參加酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。悄悄晃動混勻，37℃溫育60分鐘。
2． 測定：以空白孔調(diào)零，在450nm波長下丈量各孔的吸光度值（OD值）。測定應(yīng)在加停止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
3． 依據(jù)elisa試劑盒免費(fèi)代測規(guī)范品的濃度及對應(yīng)的OD值核算出規(guī)范曲線的直線回歸方程，再依據(jù)樣品的OD值在回歸方程上核算出對應(yīng)的樣品濃度。也能夠運(yùn)用各種應(yīng)用軟件來核算。應(yīng)記住因為樣品稀釋了的，其實踐濃度應(yīng)該乘以總稀釋倍數(shù)。
4． 棄去液體，甩干，每孔加滿稀釋后洗滌液，振動30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。如此重復(fù)5次，拍干。
5． 每孔先參加顯色劑A50μl，再參加顯色劑B50μl，悄悄震動混勻，37℃避光顯色15分鐘.
6． elisa試劑盒取出酶標(biāo)板，每孔加停止液50μl，停止反響（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)）。